Efek Ekstrak Etanol dan Fraksi Aktif Daun Kelor (Moringa oleifera L.) Terhadap Siklus Sel, Apoptosis dan Ekspresi Cox-2 pada Sel Kanker MCF-7

Abstract

Prevalensi penyakit kanker tertinggi pada perempuan adalah kanker payudara dan kanker leher rahim. Kemoterapi pada pasien kanker dengan menggunakan obat kimia banyak menimbulkan efek samping. Daun kelor (Moringa oleifera) telah terbukti dapat berfungsi sebagai antimikroba, antioksidan dan antikanker. Kandungan flavonoid dan isotiosianat dalam daun Kelor telah terbukti dapat menjadi agen kemopreventif pada sel kanker. Tujuan penelitian ini untuk membuktikan bahwa pemberian ekstrak etanol dan fraksi aktif daun kelor menurunkan aktivitas sel kanker MCF-7. Ekstraksi daun kelor dilakukan dengan metode perkolasi menggunakan etanol 96%, selanjutnya dilakukan fraksinasi dengan pelarut n-heksana, etil asetat, sehingga diperoleh fraksi n- heksana (FHDK), fraksi etilasetat (FEDK) dan fraksi sisa (FSDK). Nilai IC50 ekstrak dan fraksi diperoleh melalui uji sitotoksik terhadap sel MCF-7 dan sel Vero menggunakan metode MTT [3-(4,5- dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium bromida] assay untuk selanjutnya ditentukan nilai Indeks Selektivitas (IS) masing-masing fraksi. Fraksi yang paling aktif dilanjutkan untuk uji mekanisme penghambatan siklus sel dan apoptosis dengan metode flowsitometri serta efek penekanan ekspresi Cox-2 pada sel MCF-7 dengan metode imunositokimia. Aktivitas antikanker ekstrak etanol daun Kelor (EEDK) dan beberapa fraksi dari EEDK menunjukkan nilai IC50 dari EEDK, FHDK, FEDK, dan FSDK berturut-turut sebesar 94,44 μg/mL; 97,60 μg/mL; 2 34 ,57 μg/mL dan 5354,38 μg/mL. Nilai indeks selektivitas yang diperoleh 3,95 menunjukkan EEDK selektif terhadap sel MCF-7. EEDK dan FHDK memiliki aktivitas antikanker melalui penghambatan siklus sel pada fase G0-G1 dengan perolehan nilai akumulasi sel sebesar 63,52% dan 62,69%, dan mampu menekan ekspresi Cox-2 pada sel MCF-7 tetapi tidak menginduksi terjadinya apoptosis. Berdasarkan beberapa parameter di atas dapat disimpulkan bahwa EEDK dan FHDK memiliki aktivitas antikanker terhadap sel kanker payudara MCF-7 melalui penghambatan siklus sel dan penekanan ekspresi Cox-2.

Breast and cervical cancers are two of the most common cancer cause in women worldwide. Anticancer drugs in cancer patient may cause several side effects. Moringa leaves (Moringa oleifera. L) has been found to exhibit antimicrobial, antioxidant and anticancer activities. Flavonoids, isothiocyanate of Moringa oleifera leaves are chemical constituents which reported as chemopreventive agent in cancer cells. The aim of this study was to prove that the administration of ethanol extract and fraction active of Moringa leaves decreased the activity of MCF-7 cell lines. Moringa leaf extraction is done by percolation method using ethanolic 96%, then liquid-liquid extraction was used n-hexana and ethylacetate solution. From the extraction, the n-hexane fraction was obtained, the ethylacetate fraction and the water (residual) fraction. The IC50 fraction value was obtained through cytotoxic assay on MCF-7 cell lines and Vero cell lines using the MTT [3-(4,5- dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium bromida] assay for the selectivity index (SI) values of each fraction. The next investigation of extract and active fraction was continued to prove effect of inhibition cell cycle and apoptosis using flowsitometry method and the suppression of Cox-2 expression on MCF-7 cell lines by immunocytochemistry method. Cytotoxic activity of EEDK and some fractions of Moringa oleifera leaves was showed through IC50 values of FHDK, FEDK, and FSDK to MCF-7 cell lines, respectively 94.44 μg/mL; 97.60 μg/mL; 234.57 μg/mL and 5354.38 μg/mL. Selectivity Index of 3.95 indicates the ethanolic extract selective against MCF-7 cell lines. EEDK and FHDK giving results inhibitory the cell cycle at G0-G1 phase with a percentage of 63.52% and 62.69% and can suppress the Cox- 2 expression of MCF-7 cell lines but cannot stimulate apoptosis. Based on the results, we had conclusive that EEDK and FHDK can inhibit activity of MCF- 7 againts cell cycle and suppressing of Cox-2 expression.