Pengaruh Sel Punca Mesenkimal Terhadap Angiotensin II TYPE 1 Receptor, Asam Hialuronat, Interleukin-10 dan Platelet-Derived Growth Factor-β pada Tikus Galur Wistar Model Fibrosis Hati

Abstract

Latar belakang: Fibrosis hati sering dihubungkan dengan pembentukan jaringan parut, kerusakan parenkim hati, dan kegagalan organ. Sel punca yang berasal dari sirkulasi sel terutama sel punca mesenkimal (MSC) endogen dapat mempercepat proses regenerasi sel sehingga dapat memperbaiki fibrosis hati. Tujuan: Mengetahui pengaruh MSC terhadap angiotensin II type 1 receptor (AT1R), Asam Hialuronat (HA), Interleukin-10 (IL-10) dan Platelet-Derived Growth Factor-β (PDGF-β) pada Tikus Galur Wistar Model Fibrosis Hati. Metode: MSC diisolasi dari tali pusat tikus betina galur wistar. Tikus model fibrosis hati dilakukan dengan induksi CCl4 (dosis 1 ml/KgBB, diberikan 2 kali seminggu selama 12 minggu). 28 ekor tikus secara randomisasi dibagi menjadi 4 kelompok yaitu: kelompok kontrol negative (K1), kontrol positif (K2), kelompok MSC 1x106 (K3) dan kelompok MSC 2x106 (K4). Setelah 12 minggu terbentuk hewan coba model fibrosis hati, MSC diberikan secara intravena. Kadar Serum PDGF-β, IL-10 dan HA diperiksa dengan pemeriksaan enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) pada hari ke-3 dan 14 setelah pemberian MSC secara intravena. Ekspresi AT1R dan gambaran fibrosis hati diperiksa dengan menggunakan imunohistokimia dan pewarnaan hematoxylin eosin (HE). Hasil: Terdapat peningkatan kadar IL-10 serum secara signifikan pada kelompok yang diberikan MSC dibandingkan dengan kelompok kontrol positif pada hari ke 3 (p <0,01) dan 14 (p <0,05). Juga terdapat peningkatan secara signifikan kadar PDGF-β dan HA serum pada kelompok yang diberikan MSC dibandingkan dengan kelompok kontrol positif pada hari ke 3 (p <0,05). Namun pada hari ke 14, kadar PDGF-β dan HA serum secara signifikan menurun pada kelompok yang diberikan MSC (p <0,05), dimana penurunan tersebut diikuti dengan penurunan ekspresi AT1R dan derajat fibrosis hati yang diukur dengan pemeriksaan immunohistokimia (IHC) dan hematoxylin & eosin (HE). Kesimpulan: Pemberian MSC dapat memperbaiki fibrosis hati melalui regulasi kadar PDGF-β, IL-10, dan HA serum serta downekspresi AT1R.

Background: Liver fibrosis frequently associated with culminating in tissue scarring, loss of normal parenchyma, and eventually organ failure. Stem cell-derived circulating cells particularly endogenous mesenchymal stem cells (MSC) can play several roles in rapid regeneration process that regress liver fibrosis. Objective: To investigate the effect of MSC on angiotensin II type 1 receptor (AT1R), hyaluronic acid (HA), interleukin-10 (IL-10), and platelet derived growth factor-β (PDGF-β) in liver fibrosis rat model. Methods: MSC isolated from Wistar rats. Liver fibrosis model was established by intraperitoneal injection of CCl4 (1 ml/kg body weight twice a week for 12 weeks) in wistar rats. The survived 28 rats were randomly divided into 4 groups: negative control group (K1), positive control group (K2), MSC-treated group at a dose of 1 x 106 (K3) and MSC-treated group at a dose of 2 x 106 (K4). At 12 weeks after establishment of animal model, MSC were intravenously injected. Serum PDGF-β, IL-10 and HA level were determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) on day 3 and 14 after intravenous administration of MSC. AT1R expression levels and histopathology of the liver specimens were evaluated using immunohistochemistry (IHC) and hematoxylin eosin (HE) staining. Results : There was significantly elevated serum IL-10 level in MSC treated group compared to positive control group at day 3 (p < 0.01) and 14 ( p < 0.05). Then there was significantly elevated serum PDGF-β and HA level in MSC treated group compared to positive control group at day 3 ( p < 0.05), which was significantly reduced in MSC treated group at day 14 ( p < 0.05) as well as the reduction of expression AT1R and liver fibrosis on Immunohistochemistry (IHC) and hematoxylin & eosin (HE) staining appearance. Conclusion: MSC treatment improves liver fibrosis through PDGF-β, IL-10, HA regulation and downexpressing of the AT1R