Uji Aktivitas Antikanker Fraksi Aktif Ekstrak Etanol Kulit Batang Pohon Tanjung (Mimusopsi cortex) terhadap Sel Kanker Payudara

Abstract

Breast cancer is primary cause of death on women. Cancer is growth uncontrolled or abnormal of cells. Interest touse traditional medicine, especially forcanceron recent years tended to increase. Mimusopsi cortex’s ethanolic extract are known have cytotoxic activity against T47D cell. The aims ofthis study was investigated the characteristics of simplex and Mimusopsi cortex’s ethanolic extract, and investigated the anticancer activity of active fraction of Mimusopsi cortex’s ethanolic extract through calculated the IC50 values, selectivity index (SI) values, the mechanism of cell cycle inhibition and suppression effect of COX-2 enzyme expressionon T47D breast cancer cell. Fractions were obtained by liquid-liquid extraction of values using n-hexane and ethylacetate solvent. From the extraction were obtained n-hexane fraction, ethyl acetate fraction and aqueous fraction (residu). IC50 values of fractions were obtained through the cytotoxic test against T47D cell and normal cells (Vero) using MTT [3 -(4,5-dimetiltiazol-2-yl) -2,5difeniltetrazoliumbromide] method, then was determined SI values of each fraction. The most active fraction was continued to mechanism of cell cycle inhibiti on test using flowcyitometry method and suppresion effects of COX-2 enzyme expression on T47D cells using immunocytochemistry method. Based ons implex and ethanolic extract of Mimusopsi cortex characterization showed water content respectively 5.32% and 22.58%, water-soluble extract content 16.57% and 64.81%; ethanol-soluble extract content 20.84% and 64.15%, total ash content 3.23% and 1.01%, and acidic unsoluble ash 1.54% and 0.06%. Phytochemical screening showed steroids/triterpenoids in n-hexane fraction; flavonoids, tannins, glycosides,in ethylacetate and flavonoids, saponins, glycosides in aqueous fraction. Anticancer activity of active fraction of Mimusopsi cortex’s ethanolic extract was showed through IC50 values of n-hexane fraction, ethylacetate, and aqueous to T47D cells, respectively 5796.218 μg/ml, 398.236 μg/ml, and 145.068 μg/ml, Aqueous fraction is the most active fraction of Mimusopsi cortex’s ethanolic extract. SI value of 4.130 indicates the aqueous fraction selective against T47D cells, inhibited the G2-M phase cell cycle, and able to suppressed the COX-2 enzyme expression of T47D cells. Based on some parameters above had conclusive that active fraction of Mimusopsi cortex’s ethanolic extract has anticancer activity on T47D breast cancer cells.

Kanker payudara merupakan penyebab utama kematian pada wanita. Kanker merupakan pertumbuhan sel-sel tubuh yang tidak terkendali atau abnormal. Minat terhadap penggunaan obat tradisional khususnya untuk penyakit kanker akhir-akhir ini cenderung meningkat. Ekstrak etanol kulit batang pohon Tanjung (EEKBPT) diketahui memiliki aktivitas sitotoksik terhadap sel T47D. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui karakteristik simplisia dan EEKBPT, dan untuk mengetahui aktivitas fraksi aktif EEKBPT melalui nilai IC50, Fraksi diperoleh melalui ekstraksi cair-cair dari EEKBPT menggunakan pelarut n-heksana dan etilasetat. Dari ekstraksi tersebut diperoleh fraksi n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air (sisa). Nilai ICselektivity index (SI), mekanisme penghambatan siklus sel dan efek penekanan ekspresi enzim COX-2 sel kanker payudara T47D. 50 Hasil karakterisasi simplisia dan EEKBPT diperoleh kadar air berturut-turut5,32% dan 22,58%;kadar sari larut air 16,57%dan 64,81%; kadar sari larut dalam etanol 20,84% dan 64,15%; kadar abu total 3,23% dan 1,01%;serta kadar abu tidak larut asam 1,54% dan 0,06%. Hasil skrining fitokimia ditemukan golongan steroid/triterpenoid dalam fraksi n-heksana; flavonoid, tanin, glikosida, dalam fraksi etil asetat dan flavonoid, saponin, glikosida dalam fraksi air. fraksi diperoleh melalui uji sitotoksik terhadapsel T47D dan sel normal (Vero) menggunakan metode MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazoliumbromida] untuk selanjutnya ditentukan nilai SI masing-masing fraksi. Fraksi yang paling aktif dilanjutkan untuk uji mekanisme penghambatan siklus sel dengan metode flowsitometri dan efek penekanan ekspresi enzim COX-2 pada sel T47D dengan metode imunositokimia. Aktivitas antikanker fraksi aktif EEKBPT ditunjukkan melalui nilai IC50 fraksi n-heksana, etilasetat, dan air terhadap sel T47D berturut-turut sebesar 5796,218 μg/ml; 398,236 μg/ml; dan 145,068 μg/ml; dan fraksi air merupakan fraksi yang paling aktif. Nilai SI 4,130 yang menunjukkan fraksi ait selektif terhadapsel T47D, menghambat siklus sel padafase G2-M, dan mampu menekan ekspresi enzim COX-2 pada sel T47D. Berdasarkan beberapa parameter di atas dapat disimpulkan bahwa fraksi aktif EEKBPT memiliki aktivitas antikanker terhadap sel kanker payudara T47D.