| dc.description.abstract | Penggunaan kombinasi kemoterapi, yaitu senyawa kemoprevensi dikombinasi dengan agen kemoterapi diketahui mampu meningkatkan sensitivitas sel kanker serta efikasi kemoterapi dan penurunan toksisitasnya terhadap jaringan normal. Daun Moringa oleifera L. berpotensi sebagai antikanker, pada penelitian sebelumnya ekstrak etanolnya memberi efek sinergis meningkatkan sitotoksik doksorubisin pada sel kanker hela namun untuk kanker payudara belum dilakukan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek sitotoksik dari EEADK, indeks selektivitas (IS), efek kombinasi dengan doksorubisin, mekanisme penghambatan siklus sel, mekanisme apoptosis serta penekanan ekspresi siklin D1 dan Bcl-2 pada sel kanker payudara.
Pembuatan ekstrak dilakukan dengan cara maserasi bertingkat menggunakan pelarut berdasarkan tingkat kepolarannya, n-heksana, etil asetat dan etanol serta dilakukan skrining fitokimia dan karakterisasi terhadap simplisia dan ekstrak. Ekstrak diuji sitotoksiknya terhadap sel MCF-7 dan T47D dengan menggunakan metode kolorimetri MTT (Microculture Tetrazolium Tehnique), mekanisme penghambatan siklus sel dan apoptosis dengan metode flowsitometri serta penekanan ekspresi siklin D1 dan Bcl-2 dengan metode imunositokimia.
Hasil skrining fitokimia ENDK mengandung senyawa alkaloid, steroid; EEADK mengandung flavonoid, glikosida, saponin, tanin, steroid dan EEDK mengandung flavonoid, glikosida, tanin. Hasil uji sitotoksik EEADK pada sel kanker payudara MCF-7 dan sel T47D memberikan nilai IC50 sebesar 149,29 ± 24,41 μg/mL dan 186,56 ± 33,09 μg/mL. Pengujian sitotoksik terhadap sel normal (sel Vero) menunjukkan EEADK selektif terhadap sel MCF-7 dan T47D (IS > 3). Selanjutnya kombinasi EEADK dengan doksorubisin pada sel MCF-7 memberikan efek sinergis sangat kuat dengan konsentrasi optimal EEADK-doksorubisin yaitu 18,66 μg/mL – 1,45 μg/mL, terhadap sel T47D memberikan efek sinergis dengan konsentrasi optimal EEADK-doksorubisin 23,32 μg/mL – 0,35 μg/mL. EEADK dan kombinasinya dengan doksorubisin dilakukan uji penghambatan siklus sel terhadap sel MCF-7, memberikan hasil penghambatan siklus sel pada fase G0-G1 dengan persentase berturut-turut 69,89% dan 54,48%, sedangkan terhadap sel T47D diperoleh hasil menghambat siklus sel pada fase G0-G1 dengan persentase 55,04% dan 54,49%, serta dapat memacu apoptosis awal terhadap sel MCF-7 dengan persentase 20,59% dan 41,47%, terhadap sel T47D dengan persentase 17,76% dan 7,66% dan dapat menekan ekspresi siklin D1 dan Bcl-2.
Berdasarkan hasil tersebut maka EEADK dapat dikombinasikan dengan doksorubisin sebagai antikanker payudara karena adanya efek sinergis dan terjadinya penghambatan siklus sel serta pemacuan apoptosis. | en_US |
| dc.description.abstract | The application of a combination chemotherapy which chemoprevention compounds combined with chemotherapeutic agents is known to increase the sensitivity of cancer cells and the efficacy of chemotherapy and decreased toxicity to normal tissue. Moringa oleifera L. leaf potentially as anticancer, in previous studies of ethanol extract gave synergistic effect of cytotoxic with doxorubicin in hela cancer cells but for breast cancer not yet done.This study aims to determine the cytotoxic effects of EEADK, selectivity index (SI), the effect of combination with doxorubicin, the mechanism of cell cycle inhibition, the mechanism of apoptosis, suppression of the expression of cyclin D1 and Bcl-2 in breast cancer cells.
Preparation of extracts was done by graded with solvents on the level of polarity. The solvents were n-hexane, ethyl acetate and ethanol as well as performed phytochemical screening and characterization of simplicia and extracts. The extract tested its cytotoxicity against MCF-7 and T47D cells using the method of colorimetric MTT (Microculture Tetrazolium Tehnique), effects inhibition of cell cycle and apoptosis with flowcytometry method and suppression of cyclin D1 and Bcl-2 expression with immunocytochemistry method.
Screening phytochemical results showed NEKL contain alkaloids, steroids; EAEKL contains flavonoids, glycosides, saponins, tannins, steroids and EEKL containing flavonoids, glycosides, tannins. The test results of EAEKL cytotoxic against breast cancer cells MCF-7 and T47D cells giving IC50 value of 149.29 ± 24.41 g/mL and 186.56 ± 33.09 g/mL. Tests cytotoxic against normal (Vero) cells showed selective EAEKL against MCF-7 and T47D (SI > 3). Furthermore, the combination of EAEKL with doxorubicin in MCF-7 cells gave a very strong synergistic effect with an optimal concentration of EAEKL -doxorubicin at 18.66 μg/mL-1.45 μg/mL, to T47D cells gave a synergistic effect with optimum concentrations of EAEKL -doxorubicin 23.32 μg/mL - 0.35 μg/mL. EAEKL and its combination with doxorubicin carried out cell cycle inhibitory test against MCF-7 cells, giving results inhibitory the cell cycle at G0-G1 phase with a percentage of 69.89% and 54.48% respectively, whereas against T47D cells obtained results inhibiting the cell cycle in the phase G0-G1 with the percentage of 55.04% and 54.49%, and can stimulate early apoptosis by percentage 20.59%; 41.47% on MCF-7 cells and 17.76% ; 7.66% on T47D cells and can suppress the expression of cyclin D1 and Bcl-2.
Based on these results, EAEKL can be combined with doxorubicin as a breast anticancer because of the synergistic effect and the occurrence of cell cycle inhibition and apoptotic stimulation. | en_US |
